科普:液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)的基質(zhì)匹配校準(zhǔn)是什么?廣州中森檢
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  • 液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)中的“基質(zhì)匹配校準(zhǔn)”是什么?

    在液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS/MS)這種高靈敏度的檢測(cè)技術(shù)中,樣品中除了目標(biāo)分析物以外的其他所有成分統(tǒng)稱為基質(zhì)。這些基質(zhì)成分(如蛋白質(zhì)、脂肪、鹽類、色素、其他有機(jī)小分子等)在離子源電離過程中,可能會(huì)與目標(biāo)分析物競(jìng)爭(zhēng)電荷或改變離子化效率,導(dǎo)致目標(biāo)分析物的信號(hào)被抑制或增強(qiáng)。這種現(xiàn)象被稱為基質(zhì)效應(yīng)。

    基質(zhì)效應(yīng)會(huì)嚴(yán)重影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性:

    *如果標(biāo)準(zhǔn)品是用純?nèi)軇┡渲频?,而?shí)際樣品含有復(fù)雜基質(zhì),那么標(biāo)準(zhǔn)品在儀器上的響應(yīng)(信號(hào)強(qiáng)度)可能與實(shí)際樣品中的目標(biāo)物響應(yīng)不同。

    *這會(huì)導(dǎo)致基于純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出的樣品濃度出現(xiàn)顯著偏差(偏高或偏低)。

    “基質(zhì)匹配校準(zhǔn)”就是為了解決基質(zhì)效應(yīng)帶來的干擾而發(fā)展的一種關(guān)鍵校準(zhǔn)策略。其核心思想是:

    1.尋找“空白基質(zhì)”:找到或制備一種與待測(cè)樣品基質(zhì)類型相同或極其相似,但不含有目標(biāo)分析物(或含量可忽略不計(jì))的樣品。

    2.用空白基質(zhì)配制標(biāo)準(zhǔn)曲線:將已知濃度的目標(biāo)分析物標(biāo)準(zhǔn)品加入到這份空白基質(zhì)中,配制成一系列濃度的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)溶液。

    3.建立校準(zhǔn)曲線:用這些在真實(shí)基質(zhì)環(huán)境下的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)溶液上機(jī)分析,建立信號(hào)響應(yīng)(如峰面積)與分析物濃度之間的校準(zhǔn)曲線。

    4.樣品測(cè)定:待測(cè)樣品也經(jīng)過同樣的前處理和儀器分析條件,其目標(biāo)物的信號(hào)響應(yīng)代入到這條基于基質(zhì)匹配建立的校準(zhǔn)曲線中進(jìn)行濃度計(jì)算。

    為什么基質(zhì)匹配校準(zhǔn)能減少干擾?

    *模擬真實(shí)環(huán)境:標(biāo)準(zhǔn)品和樣品在離子源中經(jīng)歷幾乎相同的基質(zhì)環(huán)境,基質(zhì)效應(yīng)對(duì)兩者的影響程度相似。

    *抵消效應(yīng):基質(zhì)效應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中被“平等化”,其干擾在計(jì)算濃度時(shí)很大程度上被抵消了。

    *提高準(zhǔn)確性:顯著降低了因基質(zhì)效應(yīng)導(dǎo)致的定量偏差,使結(jié)果更接近真實(shí)值,尤其在復(fù)雜基質(zhì)(如生物體液、食品、環(huán)境樣品)檢測(cè)中至關(guān)重要。

    廣州中森檢測(cè)減少干擾的方法(包含基質(zhì)匹配校準(zhǔn)的應(yīng)用)

    廣州中森檢測(cè)作為專業(yè)的第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu),在利用LC-MS/MS進(jìn)行高靈敏度、高特異性檢測(cè)時(shí),會(huì)綜合運(yùn)用多種策略來減少干擾,確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠,其中基質(zhì)匹配校準(zhǔn)是核心手段之一:

    1.基質(zhì)匹配校準(zhǔn)的核心應(yīng)用:

    *嚴(yán)格篩選空白基質(zhì):針對(duì)不同樣品類型(如血清、尿液、組織、食品提取液、土壤/水提取物),精心尋找或制備合適的空白基質(zhì)(如購(gòu)買空白基質(zhì)、使用陰性樣品、人工模擬基質(zhì)等)。

    *精確配制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在空白基質(zhì)中準(zhǔn)確加入目標(biāo)物標(biāo)準(zhǔn)品,建立覆蓋預(yù)期濃度范圍的校準(zhǔn)曲線,并嚴(yán)格監(jiān)控其線性、精密度和準(zhǔn)確度。

    *質(zhì)控樣品驗(yàn)證:使用在空白基質(zhì)中加入已知濃度目標(biāo)物配制的質(zhì)控樣品(QC),貫穿整個(gè)分析批次,持續(xù)監(jiān)控方法的準(zhǔn)確度和精密度,確?;|(zhì)匹配校準(zhǔn)的有效性。

    2.優(yōu)化樣品前處理:

    *采用固相萃?。⊿PE)、液液萃?。↙LE)、QuEChERS等高效的凈化技術(shù),盡可能去除干擾物,降低基質(zhì)復(fù)雜性。

    *優(yōu)化提取溶劑、凈化條件,在保證目標(biāo)物回收率的同時(shí)最大化去除基質(zhì)干擾。

    3.儀器條件優(yōu)化:

    *精細(xì)調(diào)整離子源參數(shù)(如溫度、氣流)、碰撞能量等,找到目標(biāo)物最佳響應(yīng)且受基質(zhì)影響最小的條件。

    *利用LC的高效色譜分離能力,使目標(biāo)物與潛在的干擾物在色譜柱上實(shí)現(xiàn)良好分離,避免共流出干擾。

    4.使用穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo):

    *在樣品和標(biāo)準(zhǔn)品中加入化學(xué)性質(zhì)極其相似但質(zhì)量數(shù)不同的穩(wěn)定同位素標(biāo)記的目標(biāo)物作為內(nèi)標(biāo)。

    *內(nèi)標(biāo)與目標(biāo)物經(jīng)歷幾乎相同的基質(zhì)效應(yīng)、前處理損失和儀器波動(dòng),通過計(jì)算目標(biāo)物與內(nèi)標(biāo)的響應(yīng)比值進(jìn)行定量,能有效校正基質(zhì)效應(yīng)和過程損失帶來的變異。

    總結(jié)來說,基質(zhì)匹配校準(zhǔn)是LC-MS/MS檢測(cè)中克服基質(zhì)效應(yīng)、保證定量準(zhǔn)確性的基石。廣州中森檢測(cè)通過嚴(yán)格實(shí)施基質(zhì)匹配校準(zhǔn)策略,并結(jié)合高效的前處理凈化、精密的儀器優(yōu)化以及穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)法等手段,形成了一套完整的減少干擾、確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的技術(shù)體系,為各類復(fù)雜樣品的精準(zhǔn)分析提供了堅(jiān)實(shí)保障。

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