科普：臨床診斷液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)的血樣需要抗凝嗎？廣州中

臨床診斷液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)血樣需要抗凝嗎？

答案是：絕大多數(shù)情況下需要，并且需要選擇合適的抗凝劑。原因如下：

1.區(qū)分血漿與血清：液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS/MS）檢測(cè)的目標(biāo)分析物（如藥物、激素、代謝物、維生素等）通常存在于血液的液體部分。

*血清：是血液自然凝固后分離出的液體，不含纖維蛋白原和大部分凝血因子。獲得血清不需要抗凝劑，但需要等待血液凝固（約30-60分鐘）。

*血漿：是加入抗凝劑阻止血液凝固后，離心分離出的液體，含有纖維蛋白原。獲得血漿必須使用抗凝劑。

2.LC-MS/MS檢測(cè)的偏好：

*血漿是首選：絕大多數(shù)臨床LC-MS/MS檢測(cè)項(xiàng)目推薦使用血漿作為樣本。主要原因：

*避免凝血過(guò)程的影響：血液凝固過(guò)程會(huì)激活血小板、釋放細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)、消耗某些成分（如補(bǔ)體、凝血因子），可能改變待測(cè)分析物的濃度或引入干擾物質(zhì)。使用抗凝劑能立即阻止凝血，最大程度保持樣本原始狀態(tài)。

*更快的處理速度：采血后加入抗凝劑混勻即可離心分離血漿，無(wú)需等待凝血，縮短樣本前處理時(shí)間，尤其對(duì)不穩(wěn)定分析物有利。

*更高的樣本量：血漿的得率通常略高于血清（約15-20%）。

*血清的使用：雖然血清也可用于某些LC-MS/MS檢測(cè)（尤其是一些激素、腫瘤標(biāo)志物等），但通常是在特定方法學(xué)要求或歷史沿襲下使用。除非檢測(cè)項(xiàng)目的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）明確指定使用血清，否則應(yīng)優(yōu)先使用血漿。

廣州中森檢測(cè)抗凝劑選擇的關(guān)鍵考量

選擇合適的抗凝劑至關(guān)重要，因?yàn)椴煌目鼓齽┛赡芡ㄟ^(guò)以下方式干擾LC-MS/MS檢測(cè)：

*化學(xué)干擾：抗凝劑本身或其離子可能抑制或增強(qiáng)目標(biāo)分析物的離子化效率，影響檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性。

*金屬螯合：某些抗凝劑（如EDTA）會(huì)強(qiáng)力螯合金屬離子（如鈣、鎂、鋅），這可能影響依賴金屬離子的酶活性（雖然LC-MS/MS通常不直接測(cè)酶活性，但可能影響某些代謝物或藥物結(jié)合狀態(tài)）。

*基質(zhì)效應(yīng)：不同抗凝劑會(huì)導(dǎo)致血漿基質(zhì)成分略有差異，可能影響分析物在色譜柱上的保留行為或離子化過(guò)程。

*目標(biāo)分析物的穩(wěn)定性：某些抗凝劑可能有助于穩(wěn)定特定的不穩(wěn)定分析物。

廣州中森檢測(cè)（以及其他專業(yè)臨床檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室）在選擇抗凝劑時(shí)，會(huì)嚴(yán)格遵循以下原則：

1.檢測(cè)項(xiàng)目特異性：這是首要原則！實(shí)驗(yàn)室針對(duì)每一個(gè)具體的檢測(cè)項(xiàng)目，都會(huì)基于方法學(xué)驗(yàn)證和行業(yè)指南，明確規(guī)定所需的樣本類型（血漿/血清）和具體的抗凝劑種類。用戶必須嚴(yán)格按照檢測(cè)項(xiàng)目說(shuō)明書(shū)或?qū)嶒?yàn)室要求采集樣本。

2.常用抗凝劑及其特點(diǎn)（在LC-MS/MS中的常見(jiàn)選擇）：

*肝素（鋰鹽或鈉鹽）：

*最常見(jiàn)首選：肝素（尤其是肝素鋰）是LC-MS/MS檢測(cè)（如治療藥物監(jiān)測(cè)TDM、類固醇激素、維生素D、兒茶酚胺代謝物等）中使用最廣泛的抗凝劑。

*優(yōu)點(diǎn)：通過(guò)抑制凝血酶發(fā)揮作用，對(duì)大多數(shù)小分子分析物的干擾最小，對(duì)鈣離子濃度影響?。ǜ嗡劁囉燃眩c質(zhì)譜兼容性好，基質(zhì)效應(yīng)相對(duì)較小。

*缺點(diǎn)：可能干擾某些PCR檢測(cè)（但對(duì)LC-MS/MS無(wú)影響）。

*乙二胺四乙酸（EDTA，通常為K?或K?鹽）：

*常見(jiàn)選擇：也是廣泛使用的抗凝劑，尤其適用于血液學(xué)檢測(cè)和某些分子檢測(cè)。

*優(yōu)點(diǎn)：強(qiáng)力螯合鈣離子，抗凝效果好。

*缺點(diǎn)（LC-MS/MS中需特別注意）：強(qiáng)螯合作用可能影響某些金屬依賴性分析物或酶活性檢測(cè)（雖然LC-MS/MS主要測(cè)濃度）。EDTA離子本身是強(qiáng)螯合劑，在高濃度時(shí)可能在質(zhì)譜中產(chǎn)生信號(hào)或?qū)е禄|(zhì)效應(yīng)，需要方法學(xué)優(yōu)化。對(duì)于某些項(xiàng)目（如含金屬離子的藥物、某些微量元素、某些酶活性相關(guān)代謝物）可能不適用或需要特別驗(yàn)證。

*檸檬酸鈉（如3.2%或3.8%）：

*特定用途：主要用于凝血功能檢測(cè)。

*LC-MS/MS應(yīng)用：在常規(guī)小分子LC-MS/MS檢測(cè)中相對(duì)較少作為首選。其緩沖作用和對(duì)鈣的螯合作用可能對(duì)某些項(xiàng)目有干擾。主要用于需要模擬體內(nèi)生理?xiàng)l件或特定凝血相關(guān)研究的檢測(cè)。

3.避免使用：

*草酸鹽/氟化物：通常用于血糖檢測(cè)（抑制糖酵解），但會(huì)對(duì)很多LC-MS/MS檢測(cè)產(chǎn)生嚴(yán)重干擾，應(yīng)避免使用，除非檢測(cè)項(xiàng)目特別指定。

總結(jié)與給用戶的建議

1.必須抗凝：臨床診斷LC-MS/MS檢測(cè)絕大多數(shù)情況下要求使用血漿樣本，因此必須使用抗凝管。

2.嚴(yán)格遵循項(xiàng)目要求：廣州中森檢測(cè)會(huì)為每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目明確規(guī)定所需的抗凝劑類型（如肝素鋰、EDTA-K?等）或明確指出使用血清。在申請(qǐng)檢測(cè)或采樣前，務(wù)必查閱該項(xiàng)目的《樣本采集要求》或直接咨詢實(shí)驗(yàn)室。

3.首選肝素（尤其肝素鋰）：對(duì)于未明確指定或廣泛適用的小分子LC-MS/MS檢測(cè)（如TDM、激素、維生素等），肝素鋰抗凝血漿通常是默認(rèn)和推薦的選擇，因其干擾最小，與質(zhì)譜兼容性最佳。

4.正確采集與處理：使用指定抗凝管，采血后立即輕柔顛倒混勻數(shù)次（通常5-10次），確?？鼓齽┡c血液充分混合，避免凝塊或溶血。盡快離心分離血漿/血清，并按要求保存運(yùn)輸。

簡(jiǎn)而言之：液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)血樣絕大多數(shù)需要抗凝獲得血漿。廣州中森檢測(cè)會(huì)根據(jù)具體檢測(cè)項(xiàng)目的方法學(xué)要求，明確規(guī)定使用何種抗凝劑（最常用且兼容性好的是肝素鋰，其次是EDTA），用戶必須嚴(yán)格按項(xiàng)目要求采集樣本。切勿自行選擇抗凝劑。