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水稻原位雜交測(cè)試服務(wù)-武漢科銳諾生物(在線咨詢)

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原位雜交雜交液注意事項(xiàng)：

       （1）雜交液內(nèi)除含一定濃度的標(biāo)記探針外，還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛血1清白蛋白及載體DNA或RNA等。

       （2）雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加，可以減低探針與組織標(biāo)本之間的靜電結(jié)合。甲酰胺可使Tm降低，雜交液中含每1%的甲酰胺可分別使RNA：RNA，RNA：DNA，DNA：DNA的雜交溫度降低0.35℃，0.5℃和0.65℃。，所以雜交液中加入適量的甲酰胺，可避免因雜交溫度過(guò)高而引起的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞以及標(biāo)本的脫落。硫酸葡聚糖能與水結(jié)合，從而減少雜交液的有效容積，提高探針有效濃度，以達(dá)到提高雜交率的目的（尤其對(duì)雙鏈核酸探針）。

       在雜交液中加入牛血1清白蛋白及載體DNA或RNA等，都是為了阻斷探針與組織結(jié)構(gòu)成分之間的非特異性結(jié)合，水稻原位雜交測(cè)試服務(wù)，以減低背景。

原位雜交的應(yīng)用范圍：

①細(xì)胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位，可用于基因圖譜，基因表達(dá)和基因組進(jìn)化的研究；

②感1染組織中病毒DNA/RNA的檢測(cè)和定位，如EB病毒mRNA、人類乳1頭狀瘤1病毒和巨細(xì)胞病毒DNA的檢測(cè)；

③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測(cè)；

④基因在染色體上的定位；

⑤檢測(cè)染色體的變化，如染色體數(shù)量異常和染色體易位等；

⑥分裂間期細(xì)胞遺傳學(xué)的研究，如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定，某些腫1瘤的診斷和生物學(xué)劑量測(cè)定等。

熒光定量PCR(realtimePCR)技術(shù)是近幾年基于普通PCR技術(shù)發(fā)展的一種新技術(shù)。它借助熒光信號(hào)來(lái)檢測(cè)PCR產(chǎn)物，通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異探針，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，在擴(kuò)增過(guò)程中，每經(jīng)過(guò)一次循環(huán)，熒光定量PCR儀就會(huì)收集一次熒光信號(hào)，實(shí)時(shí)檢測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程。用熒光定量PCR法檢測(cè)目的基因僅需檢測(cè)樣本是否具有擴(kuò)增信號(hào)即可，且PCR反應(yīng)具有核酸擴(kuò)增的高1效性，可檢測(cè)出微小突變。根據(jù)探針標(biāo)記不同可分為TaqMan探針?lè)ê虯ＲMS法。 水稻原位雜交測(cè)試服務(wù)-武漢科銳諾生物(圖)由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司是從事“外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)”的企業(yè)，公司秉承“誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)，用心服務(wù)”的理念，為您提供更好的產(chǎn)品和服務(wù)。歡迎來(lái)電咨詢！聯(lián)系人：王經(jīng)理。

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