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分子病理技術(shù)服務(wù)-武漢科銳諾生物

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原位雜交（in situ hybridization）將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的核酸進(jìn)行雜交，稱為原位雜交，使用DNA或者RNA探針來(lái)檢測(cè)與其互補(bǔ)的另一條鏈在細(xì)菌或其他真核細(xì)胞中的位置。

       原位雜交技術(shù)的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列，將有放1射性或非放1射性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測(cè)DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì)，結(jié)合成專一的核酸雜交分子，經(jīng)一定的檢測(cè)手段將待測(cè)核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來(lái)。為顯示特定的核酸序列必須具備3個(gè)重要條件：組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物

       

癌組織原位雜交實(shí)驗(yàn)步驟：

       1. 將準(zhǔn)備做原位雜交的樣本常規(guī)脫水、浸蠟、包埋。切片厚度6-8μm。

       2. 玻片的處理：一般采用多聚賴氨酸或APES。

       3. 石蠟切片經(jīng)常規(guī)脫蠟至水。30%H2O2 1份+蒸餾水10份混合，室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。

       4. 暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%檸檬酸新鮮稀釋的胃蛋白酶（1ml 3% 檸檬酸加2滴濃縮型胃蛋白酶，混勻），37℃或室溫消化3--30分鐘（視標(biāo)本新舊、厚薄自行調(diào)整）。原位雜交用PBS洗3次×5分鐘。蒸餾水洗1次。

目前，我國(guó)已穩(wěn)定開展的分子病理技術(shù)主要有顯色原位雜交、熒光原位雜交、PCR、熒光定量PCR、基因芯片和DNA測(cè)序技術(shù)。顯色原位雜交(chromogenicinsituhybridization，CISH)技術(shù)是分子生物學(xué)、組織化學(xué)及細(xì)胞學(xué)相結(jié)合產(chǎn)生的一門新興技術(shù)，分子病理技術(shù)服務(wù)，是利用核酸分子單鏈間堿基互補(bǔ)的原理，將地1高辛或生物素標(biāo)記的外源核酸探針與組織、細(xì)胞或染色體上待測(cè)DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì)，結(jié)合成雙鏈雜交分子，通過(guò)過(guò)氧化物酶或堿性磷酸酶的呈色反應(yīng)將待測(cè)核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來(lái)。根據(jù)探針?lè)N類不同可分為DNA原位雜交和RNA原位雜交。

分子病理技術(shù)服務(wù)-武漢科銳諾生物由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司位于湖北省武漢市江夏區(qū)神墩四路666號(hào)武漢國(guó)英種子A棟1樓。在市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的浪潮中拼博和發(fā)展，目前科銳諾在技術(shù)合作中享有良好的聲譽(yù)?？其J諾取得全網(wǎng)商盟認(rèn)證，標(biāo)志著我們的服務(wù)和管理水平達(dá)到了一個(gè)新的高度?？其J諾全體員工愿與各界有識(shí)之士共同發(fā)展，共創(chuàng)美好未來(lái)。

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