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武漢科銳諾生物(多圖)-植物原位雜交檢測(cè)服務(wù)

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20世紀(jì)80年代的DNA原位雜交開(kāi)啟了分子病理檢測(cè)的大門(mén)，隨后相繼出現(xiàn)了在組織切片上的原位雜交，目的是檢測(cè)肝1炎和肝1癌組織中的乙1肝1病毒。之后，越來(lái)越多的腫1瘤相關(guān)基因被發(fā)現(xiàn)，一批用于檢測(cè)靶向治1療藥1物靶點(diǎn)的分子病理技術(shù)迅速問(wèn)世，如FISH檢測(cè)乳1腺癌HER2基因擴(kuò)增、ARMS法檢測(cè)肺1癌1基因突變等。

水稻種子是人類重要的食物來(lái)源，其發(fā)育涉及一個(gè)復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，其中轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮了關(guān)鍵作用。MADS轉(zhuǎn)錄因子家族成員是植物花器1官發(fā)育的重要調(diào)控因子，已有的研究表明，植物原位雜交檢測(cè)服務(wù)，幾乎所有的水稻MADS基因都在種子中表達(dá)，但對(duì)MADS家族成員參與水稻種子發(fā)育調(diào)控的研究結(jié)果仍比較少。

在這項(xiàng)研究中，研究組基于前期的表達(dá)譜研究基礎(chǔ)，分析得到了一個(gè)在水稻生殖發(fā)育階段優(yōu)先表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子MADS29。細(xì)致分析表明，MADS29在花藥、胚珠和種子中均表達(dá)，且在受精后的母體組織表達(dá)量高。MADS29的反義轉(zhuǎn)1基因植株呈現(xiàn)種子皺縮、淀粉粒形態(tài)異常、灌漿速率下降等表型。通過(guò)解剖學(xué)切片、末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記實(shí)驗(yàn)和全基因組表達(dá)譜芯片分析等，研究人員證明了MADS29通過(guò)調(diào)控程序化死1亡(PCD)過(guò)程促進(jìn)珠心細(xì)胞和珠心突起處的降解。進(jìn)一步的體外凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)顯示，MADS29能夠通過(guò)直接結(jié)合程序化死1亡相關(guān)基因的啟動(dòng)子區(qū)域而調(diào)控其表達(dá)，進(jìn)而影響胚乳發(fā)育。

原位雜交第三天

1） 用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時(shí)以上，后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。

2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置五分鐘。

3）將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul BM Purple AP Substrate（底物，用之前加5mM左旋米唑），十六孔板外面包上錫箔紙以避光，避免搖動(dòng)，室溫下顯色。

4）每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開(kāi)始顯色

5）將顯色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定，拍照。

6）4C冰箱保存。

武漢科銳諾生物(多圖)-植物原位雜交檢測(cè)服務(wù)由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司為客戶提供“外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)”等業(yè)務(wù)，公司擁有“科銳諾”等品牌，專注于技術(shù)合作等行業(yè)。，在湖北省武漢市江夏區(qū)神墩四路666號(hào)武漢國(guó)英種子A棟1樓的名聲不錯(cuò)。歡迎來(lái)電垂詢，聯(lián)系人：王經(jīng)理。

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