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湖北原位雜交-武漢貝科新肽-熒光原位雜交

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生物領(lǐng)域應(yīng)用原位雜交技術(shù)的例子:

基因表達(dá)和調(diào)控研究:原位雜交技術(shù)可以用于研究基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。例如,原位雜交檢測(cè),可以標(biāo)記特定基因的探針,檢測(cè)該基因在不同環(huán)境、不同生長(zhǎng)條件下的表達(dá)情況,進(jìn)而研究其表達(dá)調(diào)控機(jī)制。

細(xì)胞分化與發(fā)育研究:在細(xì)胞分化與發(fā)育研究中,染色體熒光原位雜交,原位雜交技術(shù)常被用于檢測(cè)和定位特定基因的表達(dá)情況,進(jìn)而了解細(xì)胞分化的過程和機(jī)制。例如,可以標(biāo)記與細(xì)胞分化相關(guān)的基因探針,檢測(cè)該基因在不同組織、不同發(fā)育階段的表達(dá)情況。

雜交?。?) 盛有2×SSC的塑料盤同,將干烤的濾膜飄浮在液面上,浸濕5分鐘。(2) 將濾膜轉(zhuǎn)到200ml預(yù)洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起,放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿,放到位于培養(yǎng)箱內(nèi)的旋轉(zhuǎn)平臺(tái)上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中,應(yīng)緩緩搖動(dòng)濾膜,防止它們粘在一起。(3) 用泡過預(yù)洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細(xì)菌碎片,以降低雜交背景而不影響陽(yáng)性雜交信號(hào)的強(qiáng)度和清晰度。(4) 將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時(shí)用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時(shí)用42℃)下,預(yù)雜交1-2小時(shí)。

原位雜交:

原位雜交是指用特定探針定位、檢測(cè)DNA、RNA的一種有效的實(shí)驗(yàn)方法,湖北原位雜交,通過把特點(diǎn)序列客隆到特殊載體上,通過轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)一條天然的RNA探針,將探針和切片樣品進(jìn)行雜交,熒光原位雜交,通過一系列顯色方法,來確定RNA或者DNA表達(dá)區(qū)域;本中心原位雜交探針采用的是第高辛和生物素標(biāo)記,靈敏度和同位素相當(dāng)。 我們采用roche標(biāo)記及顯色試劑盒,GISH/ISH/FISH按照探針進(jìn)行收費(fèi),每個(gè)試劑盒每條探針可以雜交60-80張玻片,收費(fèi)為1萬5千元,GISH雜交因需要加抗淬滅劑每條探針收費(fèi)為1萬9千元。量大優(yōu)惠!

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