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考馬斯亮藍g-250染色法測定蛋白質含量與其他方法相比有什么優(yōu)缺點
蛋白質的存在影響酸堿滴定中所用某些指示劑的顏色變化,從而改變這些染料的光吸收。在些基礎上發(fā)展了蛋白質染色測定方法。涉及的指示劑有甲ji橙、考馬斯亮藍、xiu甲fen綠和xiu ?jia酚紫。目前廣泛使用的染料是考馬斯亮藍。
考馬斯亮藍G-250在酸性溶液中為棕紅色,當它與蛋白質通過范德華鍵結合后,變?yōu)樗{色,食用藍色1號生產廠家,且在蛋白質一定濃度范圍內符合比爾定律,可在595nm處比色測定。2—5分鐘即呈da光吸收,食用藍色1號批發(fā),至少穩(wěn)定1小時。在0.01—1.0 mg蛋白質/ml范圍內均可。該法操作簡便迅速,消耗樣品量少,但不同蛋白質之間差異大,且標準曲線線性差。高濃度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、bing酮、硫酸銨和去污劑時測定有干擾。緩沖液濃度過高時,改變測定液pH值會影響顯色??捡R斯亮藍染色能力強,比色杯不洗干凈會影響光吸收值,不可用石英懷測定
保存期為5年《食用添加劑應用質量標準》(GB2760-1996)中要求:亮藍可用于果味型飲料(液、固態(tài))、水果汁型飲料、碳酸飲料、配制酒、糖塊、點心上彩裝、紅綠絲、水果罐頭、濃縮汁、青梅、對蝦片,使用量為0.025g/kg;冰激凌,使用量為0.021999g/kg。紅綠絲的使用量可翻倍;果味粉添加劑添加量按稀釋液倍率的50%添加【使用說明】將規(guī)范稱重的本產品放置器皿中,慢慢添加適量溫開水,并持續(xù)拌和使之融解,個人所得水溶液就可以用于上色。應用全過程中應留意盡量減少或降低酸、堿、y化劑、氧化劑、金屬材料電離、微生物等化學物質的影響,并留意防止受高溫與曝曬,上海食用藍色1號,防止退色或變色。
使用量:一般為0.025g/kg。
.使用方法:將準確稱量的本品置于容器中,逐漸加入適量溫水,并不斷攪拌使之完全溶解,所得溶液即可用于著色。
使用過程中應注意避免或減少酸、減、氧化計、還原計、金屬離子、微生物等物質的不良影響,并注意免受高溫與暴曬,以防褪色或變色。
復合著色劑的使用:根據需要,可將本品與本公司生產的其它色澤的著色劑按適當比例配置各種不同的顏色。
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