貝科新肽-染色體原位雜交

詢盤留言 |投訴|申領(lǐng)|刪除 產(chǎn)品編號：594565592 更新時間：2025-03-25

武漢貝科新肽科技有限公司

主營業(yè)務(wù)：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。該技術(shù)是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內(nèi)RNA表達的一種原位雜交技術(shù)。其基本原理是：在細胞或組織結(jié)構(gòu)保持不變的條件下，用標記的已知的RNA核苷酸片段，按核酸雜交中堿基配對原則，與待測細胞或組織中相應(yīng)的基因片段相結(jié)合(雜交)，所形成的雜交體(Hybrids)經(jīng)顯色反應(yīng)后在光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內(nèi)相應(yīng)的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術(shù)經(jīng)不斷改進，其應(yīng)用的領(lǐng)域已遠超出DNA原位雜交技術(shù)。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析，已成為有效的分子病理學(xué)技術(shù)，同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學(xué)的一重要方向。

雜交?。?）盛有2×SSC的塑料盤同，將干烤的濾膜飄浮在液面上，浸濕5分鐘。（2）將濾膜轉(zhuǎn)到200ml預(yù)洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起，放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿，放到位于培養(yǎng)箱內(nèi)的旋轉(zhuǎn)平臺上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中，應(yīng)緩緩搖動濾膜，防止它們粘在一起。（3）用泡過預(yù)洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細菌碎片，以降低雜交背景而不影響陽性雜交信號的強度和清晰度。（4）將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中，染色體原位雜交，在適宜溫度（即在水溶液中雜交時用68℃，而在50%甲酰胺中雜交時用42℃）下，預(yù)雜交1-2小時。

在原位雜交過程中，需要使用標記的核酸探針，通常是在性核素或非性物質(zhì)中標記的。這些探針可以通過不同的方式制備，例如從已知序列的DNA或RNA制備，或者通過使用生物信息學(xué)方法設(shè)計和合成新的探針。

在進行原位雜交時，細胞或組織需要固定在適當(dāng)?shù)闹С治锷?，例如載玻片。然后，探針與細胞或組織中的DNA或RNA進行雜交，通常是在加熱條件下進行的。接下來，通過洗滌和顯影步驟去除未結(jié)合的探針和信號增強劑，后用顯微鏡觀察雜交信號的位置。

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