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植物組織原位雜交是一種重要的分子生物學(xué)技術(shù),它可以用來研究植物基因的表達(dá)和調(diào)控。該技術(shù)利用DNA探針與目標(biāo)組織中的RNA或DNA結(jié)合,從而確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。本文將介紹植物組織原位雜交的原理、步驟和應(yīng)用。

原理

植物組織原位雜交的原理是利用DNA探針與目標(biāo)組織中的RNA或DNA結(jié)合,熒光原位雜交,從而確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。DNA探針是一段已知序列的DNA分子,可以與目標(biāo)RNA或DNA的互補(bǔ)序列結(jié)合。在組織原位雜交中,DNA探針通常標(biāo)記有熒光染料或性同位素,以便于檢測。

原位雜交(In situ hybridazation)

固定

收集斑馬魚的胚胎,在Holfretor水中培養(yǎng),到達(dá)所需要的發(fā)育時(shí)期時(shí),用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小時(shí)后用50%2%多聚甲醛溶液洗,然后換成,在-20C 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用處理,去除色素?;蛘呤褂帽斤畴逑∪芤号囵B(yǎng),可阻斷色素的形成)

原位雜交法是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,從而對特定核酸順序進(jìn)行定量定位的方法。原位雜交法可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。另有熒光原位雜交使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補(bǔ)的另一條鏈在細(xì)菌或其他真核細(xì)胞中的位置RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學(xué)或RNA原位雜交。

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